摘要
十字花科黑斑病是一種世界性的重要真菌病害，通過(guò)種子傳帶形成遠(yuǎn)距離擴(kuò)散和蔓延，可危害十字花科蔬菜的葉、莖、果等部位，造成嚴(yán)重的品質(zhì)和產(chǎn)量損失。十字花科黑斑病有3種?；椭虏【?，分別是甘藍(lán)鏈格孢(Alternaria brassicicola)，蕓薹鏈格孢(Alternaria brassicae)和蘿卜鏈格孢(Alternaria japonica)。中國(guó)南方十字花科蔬菜黑斑病多由甘藍(lán)鏈格孢菌引起，為明確該菌引起的十字花科黑斑病在浙江省的危害狀況，該研究利用分子鑒定方法，在全省開(kāi)展了甘藍(lán)鏈格孢菌危害寄主及分布范圍調(diào)查。結(jié)果顯示，5大類十字花科寄主植物中甘藍(lán)鏈格孢菌的檢獲數(shù)量從高到低依次為白菜類>油菜類>芥菜類>甘藍(lán)類>蘿卜類。在全省11個(gè)地級(jí)市89個(gè)區(qū)縣市中，有甘藍(lán)鏈格孢菌分布的地級(jí)市有9個(gè)，占比81.8%;有甘藍(lán)鏈格孢菌分布的縣區(qū)市有27個(gè)，占比30.3%。甘藍(lán)鏈格孢菌在浙江全省分布廣泛，對(duì)眾多寄主植物構(gòu)成嚴(yán)重威脅，因此必須加強(qiáng)防治。
十字花科(Cruciferae)亦稱蕓薹科(Brassicaceae)，是一個(gè)以獨(dú)特“十”字形花冠和辛辣味著稱的植物科。該科在植物界中極為繁茂，涵蓋了眾多蔬菜種類，如油菜(Brassica napus)、芥菜(Brassica juncea)、甘藍(lán)(Brassica oleracea var.capitata)、白菜(Brassica rapa)、蘿卜(Raphanus sativus)以及作為研究模式植物的擬南芥(Arabidopsis thaliana)等[1]。然而，十字花科植物的生產(chǎn)常常受到多種病害的威脅，其中十字花科黑斑病是危害嚴(yán)重的病害之一。
許多國(guó)家和地區(qū)都有十字花科黑斑病發(fā)生。據(jù)報(bào)道，美國(guó)、芬蘭、加拿大和中國(guó)臺(tái)灣地區(qū)發(fā)生嚴(yán)重[2]。1919年，在廣東省，十字花科黑斑病菌首次在甘藍(lán)上被發(fā)現(xiàn)，此后該病逐漸在國(guó)內(nèi)擴(kuò)散傳播[3]。到20世紀(jì)70年代末，其危害程度顯著加重，目前該病在國(guó)內(nèi)已普遍發(fā)生[4]。黑斑病不僅影響白菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，還會(huì)造成貯藏期腐爛[5]。因此，有效控制十字花科黑斑病已成為生產(chǎn)中的重要課題。
十字花科黑斑病主要由3種?；椭虏【穑ǜ仕{(lán)鏈格孢(Alternaria brassicicola)，蕓薹鏈格孢(Alternaria brassicae)和蘿卜鏈格孢(Alternaria japonica)[6]。我國(guó)南方十字花科黑斑病多由甘藍(lán)鏈格孢菌引起[5]，浙江省潮濕多雨，適合該病菌發(fā)生流行。為明確該病菌在浙江省的危害現(xiàn)狀，本研究參考肖長(zhǎng)坤等[7]的分子鑒定方法，根據(jù)白菜黑斑病菌核糖體5.8S rDNA側(cè)翼ITS區(qū)種水平上的保守區(qū)域?qū)诎卟【?個(gè)種進(jìn)行快速鑒定，并在全省開(kāi)展甘藍(lán)鏈格孢菌分布及危害寄主概況調(diào)查，以期為十字花科黑斑病的科學(xué)防控提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1調(diào)查方法
以農(nóng)業(yè)農(nóng)村部辦公廳自然資源部辦公廳印發(fā)的《農(nóng)業(yè)外來(lái)入侵物種普查面上調(diào)查技術(shù)規(guī)程(試行)》為依據(jù)，在全省所有涉農(nóng)的區(qū)縣市以踏查和樣地調(diào)查的方式開(kāi)展十字花科黑斑病菌分布范圍、發(fā)生面積、危害狀況調(diào)查。
1.2分子鑒定方法
甘藍(lán)鏈格孢菌(Alternaria brassicicola)分子鑒定參考肖長(zhǎng)坤等[7]的方法。
采用通用引物核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(rDNA-ITS)ITS1、ITS4鑒定引物和甘藍(lán)鏈格孢特異性引物Abra1、Abra2。
ITS1 5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'
ITS4 5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'
Abra1 5'-ACCTCAGCAGCATCTGCTGTTG-3'
Abra2 5'-GGCTTTATGGATGCTGACCTTG-3'
1.3數(shù)據(jù)分析
利用調(diào)查數(shù)據(jù)繪制甘藍(lán)鏈格孢菌(A.brassicicola)全省地級(jí)市、縣區(qū)市分布圖和統(tǒng)計(jì)發(fā)生比例及在5大類十字花科作物上的檢獲數(shù)量。
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