1.3.6芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物大分子外滲的影響
每孔加入200μL濃度為1×106 CFU/mL的鮑曼不動(dòng)桿菌菌液到24孔板中，再加入200μL濃度為1/4×MIC、1/2×MIC、1×MIC、2×MIC芍藥苷的肉湯培養(yǎng)液，37℃培養(yǎng)16 h。培養(yǎng)結(jié)束后，取出300μL待測樣品，于4℃、2000×g離心15 min，取出上清液100μL加入96孔板中，于260 nm處測定吸光度值。以不含芍藥苷的肉湯培養(yǎng)基作為對(duì)照。
1.3.7芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜形成能力的影響
每孔加入100μL濃度為1×106 CFU/mL的鮑曼不動(dòng)桿菌菌液到96孔板中，再加入100μL濃度為1/4×MIC、1/2×MIC、1×MIC、2×MIC芍藥苷的肉湯培養(yǎng)液，37℃培養(yǎng)16 h。PBS緩沖液洗滌96孔板管壁上未黏附的菌體，再用200μL的PBS重懸菌體。加入200μL甲醇固定20 min，采用200μL濃度為2%的結(jié)晶紫染色液對(duì)生物被膜染色20 min。加入200μL濃度為33%的冰醋酸進(jìn)行細(xì)胞脫色，于630 nm處測定吸光度值。不含芍藥苷的肉湯培養(yǎng)基作為對(duì)照。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS 22.0軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)性、獨(dú)立性以及方差齊性的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組比較采用單因素方差分析（ANOVA）。t檢驗(yàn)為雙尾、校正多重比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
2.結(jié)果
2.1病原菌分布情況
2023年1月至2024年12月期間，我院呼吸科患者標(biāo)本共分離獲得2606株病原菌，其中革蘭陽性菌417株（16.02%），革蘭陰性細(xì)菌1646株（63.15%），真菌543株（20.83%）。革蘭陽性菌中檢出率排名前五位的細(xì)菌為金黃色葡萄球菌（4.64%）、乙型溶血性鏈球菌（4.34%）、屎腸球菌（2.49%）、頭狀葡萄球菌（2.42%）、紋帶棒桿菌（2.11%）；革蘭陰性細(xì)菌中檢出率排名前五位的細(xì)菌為鮑曼不動(dòng)桿菌（18.38%）、肺炎克雷伯菌（13.62%）、大腸埃希菌（9.02%）、銅綠假單胞菌（8.33%）、嗜麥芽窄食單胞菌（4.30%）；真菌檢出率排名前五位的是熱帶假絲酵母（5.87%）、白假絲酵母（4.76%）、季也蒙假絲酵母（2.49%）、光滑假絲酵母（2.11%）、葡萄牙假絲酵母（1.61%）。見表1。
表1呼吸科患者標(biāo)本病原菌分布情況
2.2主要革蘭陰性細(xì)菌耐藥情況
如表2所示，鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)阿米卡星、氨芐西林、亞胺培南、美羅培南、慶大霉素等抗生素表現(xiàn)出耐藥，耐藥率超過95.00%；肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢唑啉、氨芐西林和環(huán)丙沙星耐藥率超過了50.00%；大腸埃希菌對(duì)亞胺培南、美羅培南、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氨曲南和替卡西林等抗生素表現(xiàn)出耐藥，耐藥率超過50.00%。
表2呼吸科主要革蘭陰性細(xì)菌對(duì)不同抗生素的耐藥情況
2.3芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生長的影響
如表3所示，從我院呼吸科分離獲得的編號(hào)為23091779的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢他啶、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉維酸、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、美羅培南等抗生素均表現(xiàn)出耐藥。濃度為50 mg/mL的芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779的抑菌圈直徑為（27.14±0.36）mm。根據(jù)《M100抗微生物藥物靈敏度試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)》判定鮑曼不動(dòng)桿菌23091779對(duì)芍藥苷的靈敏度為極敏。如圖1所示，芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌的MIC和MBC分別為75μg/mL和150μg/mL，且與鮑曼不動(dòng)桿菌濃度無關(guān)。如圖2所示，與陰性對(duì)照組相比，芍藥苷與鮑曼不動(dòng)桿菌23091779共培養(yǎng)能夠抑制菌體的生長，且隨著芍藥苷濃度的升高，鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生長受到的抑制越大。
表3鮑曼不動(dòng)桿菌23091779的抗生素敏感性測定
圖1芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌的MIC和MBC
注：ns表示P＞0.05。
圖2不同濃度芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生長曲線的影響
注：NC為陰性對(duì)照。
2.4芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物被膜形成的影響
不同濃度的芍藥苷干預(yù)16 h后的鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物被膜形成情況如表4所示。陰性對(duì)照鮑曼不動(dòng)桿菌2309177生物被膜A值為0.4423±0.2120。隨著芍藥苷濃度的升高，鮑曼不動(dòng)桿菌2309177生物被膜A值顯著降低。當(dāng)芍藥苷濃度為1/4×MIC時(shí)，鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物被膜A值降至為0.3712±0.1921（t=4.635，P=0.042）。
表4芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物被膜形成的影響
2.5芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物大分子外滲的影響
如圖3所示，與陰性對(duì)照組相比，隨著芍藥苷濃度的升高；當(dāng)芍藥苷濃度≥1/4×MIC時(shí)，鮑曼不動(dòng)桿菌2309177生物大分子外滲顯著升高（t=6.736，P＜0.001）。
圖3不同濃度芍藥苷對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌23091779生物大分子外滲的影響
注：NC為陰性對(duì)照，a為與NC比較，P＜0.05。
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