2結(jié)果與分析
2.1甘藍(lán)鏈格孢菌PCR檢測(cè)結(jié)果
以寧波象山石浦鎮(zhèn)上灣村白菜樣品中十字花科黑斑病菌的檢測(cè)為例。PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，所有田間采集的樣品(ZD1765-3~ZD1768-3)均特異性地?cái)U(kuò)增出了甘藍(lán)鏈格孢(Alternaria brassicicola)457 bp的目標(biāo)條帶(圖1)，即檢驗(yàn)樣品為陽(yáng)性。將陽(yáng)性樣品送至測(cè)序公司測(cè)序，在NCBI上比對(duì)測(cè)序結(jié)果。分析表明，陽(yáng)性樣品中存在甘藍(lán)鏈格孢，即存在由甘藍(lán)鏈格孢菌引起的十字花科黑斑病。
圖1植物病樣中甘藍(lán)鏈格孢菌檢測(cè)
1—Abra1/Abra 2引物擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照;2~5—ZD1765-3~ZD1768-3的ITS1/ITS4引物擴(kuò)增;6~9—ZD1765-3~ZD1768-3的Abra1/Abra 2引物擴(kuò)增;10—無(wú)菌水的Abra1/Abra2引物擴(kuò)增。
2.2甘藍(lán)鏈格孢菌主要寄主分析
本次全省調(diào)查發(fā)現(xiàn)，十字花科黑斑病菌的寄主植物共計(jì)19種(圖2)。根據(jù)十字花科蔬菜的種類(lèi)，可將這些寄主分為五個(gè)類(lèi)別:(1)白菜類(lèi)，占比62.91%，共計(jì)95個(gè)采樣點(diǎn)檢驗(yàn)出了甘藍(lán)鏈格孢菌(Alternaria brassicicola)，其中白菜34個(gè)、菜薹1個(gè)、大白菜2個(gè)、杭白菜1個(gè)、青菜41個(gè)、菘菜1個(gè)、薹菜1個(gè)、小青菜14個(gè);(2)油菜類(lèi)，占比13.91%，共計(jì)21個(gè)采樣點(diǎn);(3)芥菜類(lèi)，占比10.60%，共計(jì)16個(gè)采樣點(diǎn)，具體包括棒菜1個(gè)、芥菜9個(gè)、榨菜6個(gè);(4)甘藍(lán)類(lèi)，占比7.95%，共計(jì)12個(gè)采樣點(diǎn)，具體為甘藍(lán)7個(gè)、花椰菜5個(gè);(5)蘿卜類(lèi)，占比4.64%，共計(jì)7個(gè)采樣點(diǎn)。
圖2檢獲甘藍(lán)鏈格孢菌的十字花科蔬菜類(lèi)別占比
綜上，寄主植物十字花科黑斑病發(fā)病率從高到低依次為白菜類(lèi)>油菜類(lèi)>芥菜類(lèi)>甘藍(lán)類(lèi)>蘿卜類(lèi)。
2.3甘藍(lán)鏈格孢菌在全省的分布概況
浙江省有11個(gè)地級(jí)市，89個(gè)區(qū)縣市，其中有甘藍(lán)鏈格孢菌分布的地級(jí)市有9個(gè)(圖3)，占比81.8%;有該菌分布的縣區(qū)市有27個(gè)(圖4)，占比30.3%。
圖3甘藍(lán)鏈格孢菌在浙江省11個(gè)地級(jí)市的分布概況
此地圖基于審圖號(hào)為GS(2022)1873號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)地圖制作，底圖無(wú)修改，圖4同。
圖4甘藍(lán)鏈格孢菌在浙江省89個(gè)區(qū)縣市的分布概況
全省27個(gè)有甘藍(lán)鏈格孢菌分布的區(qū)縣市田間發(fā)生點(diǎn)位數(shù)統(tǒng)計(jì)如下(圖5)。具體為:常山13個(gè)、衢江5個(gè)、桐廬24個(gè)、淳安20個(gè)、臨平12個(gè)、余杭4個(gè)、富陽(yáng)3個(gè)、長(zhǎng)興1個(gè)、安吉1個(gè)、德清7個(gè)、上虞17個(gè)、越城7個(gè)、新昌6個(gè)、諸暨4個(gè)、嵊州3個(gè)、慈溪3個(gè)、象山1個(gè)、溫嶺12個(gè)、黃巖1個(gè)、臨海1個(gè)、仙居1個(gè)、路橋1個(gè)、玉環(huán)1個(gè)、平陽(yáng)1個(gè)、鹿城1個(gè)、甌海1個(gè)、遂昌2個(gè)。
圖5 27個(gè)區(qū)縣市甘藍(lán)鏈格孢菌發(fā)生點(diǎn)位數(shù)
3討論
十字花科蔬菜是浙江省的一類(lèi)重要經(jīng)濟(jì)作物，由于其種植簡(jiǎn)單、營(yíng)養(yǎng)豐富而成為百姓餐桌上的重要蔬菜品種，同時(shí)，種植十字花科蔬菜也是浙江省農(nóng)民增收創(chuàng)收的重要來(lái)源之一。十字花科黑斑病菌(Alternaria brassicicola)危害十字花科作物的葉片、莖稈、角果和花球等部位，常在葉片表面形成灰褐至暗褐色、近圓形的同心輪紋狀病斑[8]，對(duì)品質(zhì)和產(chǎn)量影響很大[9]，是南方十字花科蔬菜上一種重要的外來(lái)入侵病害。
甘藍(lán)鏈格孢菌的全省普查結(jié)果顯示，浙江省十字花科黑斑病的發(fā)生具有一定區(qū)域性，主要與是否有較多的寄主植物分布及氣象因子是否滿(mǎn)足病害流行條件密切相關(guān)。在全省11個(gè)地級(jí)市中，有9個(gè)地級(jí)市檢獲甘藍(lán)鏈格孢菌，占比81.8%，而在89個(gè)區(qū)縣市中，有27個(gè)區(qū)縣檢獲該病菌，占比30.3%，說(shuō)明作為外來(lái)入侵病害的甘藍(lán)鏈格孢菌在浙江省已具有較高的發(fā)生頻率和較廣的地理分布。此外，寄主植物對(duì)甘藍(lán)鏈格孢菌的侵染危害有著重要影響，不同種類(lèi)十字花科蔬菜黑斑病的發(fā)病率存在較大差異。本次調(diào)查顯示，白菜類(lèi)發(fā)病率最高，其次依次為油菜類(lèi)、芥菜類(lèi)、甘藍(lán)類(lèi)和蘿卜類(lèi)。
2024年浙江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳組織的外來(lái)物種風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果顯示，在浙江省，甘藍(lán)鏈格孢菌屬中度危險(xiǎn)有害生物，種子攜帶是該病菌傳播擴(kuò)散主要途徑。由于浙江省十字花科蔬菜種植面積大，良種需求旺盛，異地種子和產(chǎn)品貿(mào)易頻繁，導(dǎo)致病菌遠(yuǎn)距離擴(kuò)散蔓延的可能性極高，因此，種子檢疫和播種前浸藥處理是預(yù)防和控制十字花科黑斑病流行的一項(xiàng)有效措施。
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