目錄
一、無(wú)菌室的要求
二、樣品準(zhǔn)備
三、培養(yǎng)基與試劑制備的制備和殺菌
四、微生物實(shí)驗(yàn)操作
五、微生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告
七、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的校準(zhǔn)、維護(hù)和性能驗(yàn)證
一.微生物無(wú)菌室基本要求及管理
1.1無(wú)菌室的基本建設(shè)要求
1.1.1根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室所涉及的生物安全等級(jí)，無(wú)菌室的設(shè)計(jì)和建設(shè)應(yīng)符合GB 50364和GB 19489的相關(guān)要求。
1.1.2無(wú)菌室大小應(yīng)能夠滿足檢驗(yàn)工作的需要，內(nèi)墻為淺色，地面和地面應(yīng)光滑，墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形，無(wú)縫隙，無(wú)死角，易于清潔和消毒。
1.1.3無(wú)菌室入口處應(yīng)設(shè)置緩沖間，緩沖間內(nèi)應(yīng)安裝非手動(dòng)式開(kāi)關(guān)的洗手盆，并可有毛巾。緩沖間應(yīng)有足夠的面積以保證操作人員更換工作服及鞋帽。
1.1.4無(wú)菌室內(nèi)工作臺(tái)的高度約80cm,工作臺(tái)應(yīng)保持水平，工作臺(tái)二應(yīng)無(wú)滲漏，耐腐蝕，易于清潔、消毒。
1.1.5無(wú)菌室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻，工作臺(tái)面的光照度應(yīng)不低于540Ix。
1.1.6無(wú)菌室應(yīng)具備適當(dāng)?shù)耐L(fēng)和溫度調(diào)節(jié)的條件。無(wú)菌室的推薦溫度為20℃，相對(duì)濕度為40%~60%。
1.1.7緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能達(dá)到空氣消毒效果的紫外燈或其他適宜的消毒裝置。
1.2無(wú)菌室的管理
1.2.1無(wú)菌室在使用前和使用后應(yīng)進(jìn)行有效的消毒。
1.2.2無(wú)菌室的滅菌效果應(yīng)至少每?jī)芍茯?yàn)證一次。
1.2.3應(yīng)制定清潔、消毒、滅菌、使用和應(yīng)急處理程序。
1.2.4應(yīng)記錄環(huán)境檢測(cè)結(jié)果，并歸檔保存。
1.2.5不符合規(guī)定時(shí)應(yīng)立即停止使用
1.3微生物實(shí)驗(yàn)室消毒處理方法
1.3.1無(wú)菌室
1.3.1.1紫外線消毒
（1）在室溫20℃~25℃時(shí)，220V30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2,低于此值時(shí)應(yīng)更換，適當(dāng)數(shù)量的紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。
（2）紫外線消毒時(shí)，無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。
（3）在無(wú)人條件下，可采取紫外線消毒，作用時(shí)間應(yīng)30min,室內(nèi)濕度20%或40%、相對(duì)濕度大于60%時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。
（4）用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線的直接照射，且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。
（5）人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。
（6）按照GB 15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)紫外線的消毒與殺菌效果。
1.3.1.2臭氧消毒
（1）封閉無(wú)菌室內(nèi)，無(wú)人條件下，采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)作業(yè)。
（2）按照GB/T 18202的規(guī)定，檢測(cè)室內(nèi)臭氧的濃度。
1.3.1.3無(wú)菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法(沉降法)
（1）在消毒處理后與開(kāi)展檢驗(yàn)活動(dòng)之前期間采樣。
（2）取樣點(diǎn)的選擇應(yīng)基于人員流量情況和做試驗(yàn)的頻率。一般情況下，無(wú)菌室面積30m2時(shí)，從所設(shè)定的條對(duì)角線選取3點(diǎn)，即中心1點(diǎn)，兩端各距離墻1m處各取1點(diǎn)；無(wú)菌室面積30m2時(shí)，選取東西北中5點(diǎn)，其中東點(diǎn)、南點(diǎn)、西點(diǎn)、北點(diǎn)均距離墻lm。
1.3.2生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo):
裝配與包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤2500CFU/m3
工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤20CFU/cm2
工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤300CFU/只手，并不得檢出致病菌。
二.樣品的準(zhǔn)備
食品生產(chǎn)線每?jī)尚r(shí)取樣1次，異常停機(jī)時(shí)再取一次。每天取樣12瓶，然后在12瓶中隨機(jī)抽取3瓶做微生物檢測(cè)。
做微生物之前，在緩沖間用75%的酒精對(duì)樣品外表進(jìn)行殺菌。之后送到傳遞窗口處。避免樣品對(duì)無(wú)菌間造成二次污染。
2.1工作臺(tái)面與工人手表面采樣與測(cè)試方法
2.1.1樣品采集
工作臺(tái):將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cm*5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用以浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。
工人手:被檢人五指并攏，用以浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來(lái)回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。
2.1.2細(xì)菌菌落總數(shù)檢測(cè)
將已采集的樣品在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，每支采樣管充分混勻后取1mL樣液，放入滅菌平皿內(nèi)，傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個(gè)樣品平行接種兩個(gè)平皿，置36℃土2℃培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。
2.2空氣采樣與測(cè)試方法
2.2.1樣品采集
在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行。
室內(nèi)面積不超過(guò)30m3，在對(duì)角線上設(shè)里中外三點(diǎn):里、外點(diǎn)位置距墻1m;室內(nèi)面積超過(guò)30m3,設(shè)東西南北中5點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1m。采樣時(shí)，將含營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板(真徑9cm)置采樣點(diǎn)(約桌面高度)，打開(kāi)平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min。
2.2.2細(xì)菌培養(yǎng)
在采樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置36℃土2℃培養(yǎng)24h,取出檢查有無(wú)污染，將污染培養(yǎng)基剔除。
將已采集的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，于36℃土2℃培養(yǎng)48h,觀察結(jié)果，計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。
三、培養(yǎng)基與試劑制備的制備和殺菌
3.1試劑的配制
3.1.1無(wú)菌生理鹽水的配制
用精確到0.01g的電子稱稱取8.5g微生物檢測(cè)專用鹽，在100mL燒杯中用二次凈化水溶解后，轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL備用。
3.1.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制
稱取35g營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后，轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。
3.2試劑的分裝
3.2.1生理鹽水的分裝
將配置好的生理鹽水用500mL的量筒按照每個(gè)錐形瓶裝225mL的量進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶，并用牛皮紙將瓶口包扎好。
3.2.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂的分裝
將配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂用500mL的錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶，并用牛皮紙將瓶口包扎好。
3.2.3孟加拉紅瓊脂的分裝
將配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂用500mL的錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶，并用牛皮紙將瓶口包扎好。
3.2.4乳糖膽鹽肉湯的分裝
將配置好的乳糖膽鹽用10mL的量管分裝在玻璃試管中，試管規(guī)格為15*150mm,錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶，并用牛皮紙將瓶口包扎好。
3.3培養(yǎng)基和試劑滅菌
3.3.1培養(yǎng)基通常應(yīng)采用高壓濕熱滅菌法，121℃滅菌15min,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基，115℃滅菌20min。)
3.3.2部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基，膽硫乳培養(yǎng)基等)，只能煮沸滅菌。
3.3.3對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì)，應(yīng)采用膜過(guò)濾方法進(jìn)行過(guò)濾除菌。
3.3.4即用型試劑不需滅菌，應(yīng)參見(jiàn)相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說(shuō)明，直接使用。
3.4試劑的殺菌
3.4.1生理鹽水的殺菌
將分裝完畢的生理鹽水，放在殺菌釜內(nèi)，擺放好。然后關(guān)上殺菌釜，打開(kāi)電源，升溫到80℃時(shí)，打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣，帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121℃開(kāi)始計(jì)時(shí)，殺菌30min停止加熱，進(jìn)行自然冷卻，待壓力回歸零時(shí)，打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待條菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜，將生理鹽水取出送往微生物操作間的小窗內(nèi)。
3.4.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂的殺菌
將分裝完畢的營(yíng)養(yǎng)瓊脂，放在殺菌釜內(nèi)，擺放好。然后關(guān)上殺菌釜，打開(kāi)電源，升溫到80℃時(shí)，打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣，帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121℃開(kāi)始計(jì)時(shí)，殺菌30min停止加熱，進(jìn)行自然冷卻，待壓力回歸零時(shí)，打開(kāi)放氣閥門(mén)門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜，將生理鹽水取出送往微生物操作間預(yù)處理間的水浴鍋，進(jìn)行保溫，水浴鍋的溫度46土1℃。
3.5培養(yǎng)基的配制
3.5.1孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基的配制
稱取36g營(yíng)養(yǎng)瓊脂用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后，轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。
3.5.2乳糖膽鹽肉湯的配制
稱取36g營(yíng)養(yǎng)瓊脂用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后，轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。
3.6培養(yǎng)基的殺菌
3.6.1孟加拉紅瓊脂的殺菌
將分裝完畢的營(yíng)養(yǎng)瓊脂，放在殺菌釜內(nèi)，擺放好。然后關(guān)上殺菌釜，打開(kāi)電源,升溫到80℃時(shí)，打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣，帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121℃開(kāi)始計(jì)時(shí)，殺菌30min停止加熱，進(jìn)行自然冷卻，待壓力回歸零時(shí)，打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜，將生理鹽水取出送往微生物操作間預(yù)處理間的水浴鍋，進(jìn)行保溫，水浴鍋的溫度46℃士1℃。
3.6.2乳糖膽鹽肉湯的殺菌
將分裝完畢的乳糖膽鹽發(fā)酵管，放在殺菌釜內(nèi)，擺放好。然后關(guān)上殺菌金，打開(kāi)電源，升溫到80℃時(shí)，打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣，帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121℃開(kāi)始計(jì)時(shí)，殺菌30min停止加熱，進(jìn)行自然冷卻，待壓力回歸零時(shí)，打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜，將生理鹽水取出送往微生物操作間的小窗內(nèi)。
3.7培養(yǎng)皿和吸量管的殺菌
培養(yǎng)皿將培養(yǎng)基處理完，用84消毒液浸泡30min后，用洗潔精清洗干凈后用干燥箱烘干(160℃、30min)后，用牛皮包扎好，在160℃干熱殺菌2小時(shí)。1mL的吸量管也用84消毒液浸泡30min后，用洗潔精清洗干凈后用干燥箱烘干(160℃、30min)后，用牛皮紙包扎好，在160℃干熱殺菌2小時(shí)。
3.8器具和設(shè)備滅菌
3.8.1濕熱滅菌:采用高壓滅菌器，121℃滅菌20min,適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等按照GB 15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。
3.8.2干熱滅菌:采用干燥箱滅菌，160℃滅菌2h,180℃滅菌1h，適用于玻璃器皿，不銹鋼器具等。
3.8.3液體消毒劑消毒:使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑對(duì)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面進(jìn)行消毒。可按照GB 15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)自配或商業(yè)消毒劑的消毒效果;可按照ISO 18593,監(jiān)測(cè)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面的消毒效果。
3.9培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題
3.9.1培養(yǎng)基不能凝固的原因
制備過(guò)程中過(guò)度加熱；
低pH值造成培養(yǎng)基酸解；
稱量不正確；
瓊脂未完全溶解；
培養(yǎng)基成分未充分混勻。
3.9.2培養(yǎng)基pH值不正確的原因
制備過(guò)程中過(guò)度加熱;
水質(zhì)不佳;
外部化學(xué)物質(zhì)污染;
測(cè)定pH值時(shí)溫度不正確;
pH計(jì)未正確校準(zhǔn);
脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差。
3.9.3培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀的原因
制備過(guò)程中過(guò)度加熱;
水質(zhì)不佳;
脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;
pH未正確控制。
3.9.4培養(yǎng)基顏色異常的原因
制備過(guò)程中過(guò)度加熱;
水質(zhì)不佳;
脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;
pH不正確;
外來(lái)污染。
3.9.5培養(yǎng)基出現(xiàn)抑制重復(fù)性差
制備過(guò)程中過(guò)度加熱;
水質(zhì)不佳;
脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;
使用成分不正確，如：成分稱量不準(zhǔn)，添加物濃度不正確。
3.9.6培養(yǎng)基選擇性差的原因
制備過(guò)程中過(guò)度加熱;
脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;
配方使用不對(duì);
添加成分不正確，如加入添加成分時(shí)培養(yǎng)
基過(guò)熱或添加濃度錯(cuò)誤。
四、微生物實(shí)驗(yàn)操作
4.1實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
4.1.1無(wú)菌操作臺(tái)和微生物操作間殺菌消毒。
每次做實(shí)驗(yàn)之前，用75%的酒精對(duì)無(wú)菌操作臺(tái)和微生物操作間進(jìn)行噴灑消毒，然后開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)上面的紫外燈對(duì)無(wú)菌操作臺(tái)殺菌30min以上。同時(shí)，開(kāi)啟微生物操作間紫外燈對(duì)空氣殺菌消毒30min以上。
4.1.2微生物檢驗(yàn)人員的工作服、帽、口罩和鞋子的殺菌。微生物檢驗(yàn)人員的工作服、帽、口罩和鞋子在實(shí)驗(yàn)之前，在微生物操作緩沖間用紫外燈殺菌30min以上。操作人員在進(jìn)入微生物操作間時(shí)，先用香皂清洗手，然后用消毒好的毛巾擦干手，再用75%的酒精對(duì)手進(jìn)行噴灑殺菌。
4.1.3營(yíng)養(yǎng)瓊脂和孟加拉紅培養(yǎng)基外表面的殺菌。
營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在拿進(jìn)微生物操作間時(shí)，先用75%的酒精噴酒消毒，因?yàn)殄F形瓶外表面容易長(zhǎng)菌，同時(shí)在打開(kāi)錐形瓶塞是用酒精燈對(duì)瓶塞外表烤邊進(jìn)行殺菌。微生物操作時(shí)，倒平板時(shí)，培養(yǎng)皿應(yīng)該靠近酒精燈，同時(shí)每次對(duì)錐形瓶口烤下。
4.1.4乳糖膽鹽發(fā)酵口和樣品的口殺菌。
五、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理
5.1對(duì)于培養(yǎng)物及其污染的物品(如斜面，用過(guò)的吸量管、細(xì)菌培養(yǎng)皿等)，應(yīng)使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑(參照D.1)對(duì)處理后一定時(shí)間，或121℃高壓滅菌至少30min,或者其他有效處理措施。將處理物倒入特殊標(biāo)識(shí)的垃圾袋內(nèi)，直接送到指定地點(diǎn)。
5.2對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體及相關(guān)廢棄物，按照GB 14925的規(guī)定進(jìn)行處理。
5.3記錄并保留廢棄物和處理的記錄。
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告
6.1菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)
可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。
選取南落數(shù)在30CF∪到300CFU之間、無(wú)基延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)，低于30CFU平板記錄具體菌落數(shù)，大于300CFU的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。
其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù):若狀菌落不到平板的一半，而其余一半菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。
6.2菌落總數(shù)的計(jì)算方法
若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(mL)樣品中菌落總數(shù)的結(jié)果。
若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，按公式計(jì)算。
若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)大于300CFU,則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)小于30CFU,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均不在30CFU300CFU之間，其中一部分小于30CFU或大于300CFU,則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
6.3菌落總數(shù)的報(bào)告
菌落數(shù)小于100CFU時(shí)，按照“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。
菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約:取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù):也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。
若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落蔓延。
若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。
6.4霉菌和醇母菌計(jì)數(shù)
可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。
選取菌落數(shù)在10CFU到150CFU的平板、根據(jù)菌落形態(tài)分別計(jì)數(shù)霉菌和醉母數(shù)。霉菌蔓延生長(zhǎng)覆蓋整個(gè)平板的可記錄為多不可數(shù)。菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。
6.5霉菌和醇母菌菌落總數(shù)的計(jì)算方法
計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋信數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)小于10CFU,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
若所有稀釋度(包括液休樣品原液)平板均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算:如為原液，則以小于1計(jì)數(shù)。
6.6霉菌和酵母菌菌落總數(shù)的報(bào)告
菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按“四舍五入”原則修約，采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。
菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約:取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則可。采用兩位有效數(shù)字。
七、設(shè)備的校準(zhǔn)、維護(hù)和性能驗(yàn)證
7.1總則
7.1.1設(shè)備操作要求
實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)確保每位操作人員均能按照說(shuō)明書(shū)或設(shè)備操作指導(dǎo)書(shū)的要求進(jìn)行操作。
7.1.2設(shè)備手冊(cè)
所有設(shè)備檔案應(yīng)按照易于檢索的方式存檔。包括設(shè)備手冊(cè)，使用說(shuō)明書(shū)、維修保養(yǎng)指南:購(gòu)買(mǎi)時(shí)所附帶的全部技術(shù)資料以及采購(gòu)、驗(yàn)收的記錄。還應(yīng)該搜集設(shè)備使用記錄、維修保養(yǎng)記錄等。
7.1.3設(shè)備記錄
7.1.3.1應(yīng)詳細(xì)記錄與預(yù)期質(zhì)量控制結(jié)果不一致的情況，附上所采取的糾正措施，由負(fù)責(zé)分析的人員驗(yàn)證并通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期審核這些記錄。
7.1.3.2每臺(tái)對(duì)檢測(cè)質(zhì)量有影響的設(shè)備應(yīng)有使用記錄本并放在設(shè)備附近。
7.1.3.3有關(guān)設(shè)備的每個(gè)事件都應(yīng)記錄在案，包括日期、事件、采取的糾正措施、登記人的姓名等。
7.1.3.4應(yīng)保存所有設(shè)備最近三年的使用記錄本和維護(hù)記錄本。
7.2設(shè)備的校準(zhǔn)
應(yīng)根據(jù)需要、設(shè)備類型和以往的性能情況和相應(yīng)的法規(guī)要求確定校準(zhǔn)頻率(見(jiàn)表C.1)
7.2.1設(shè)備校準(zhǔn)要求和頻率
7.2.2設(shè)備性能驗(yàn)證要求和頻率
7.2.3設(shè)備維護(hù)、清潔的要求和頻率
相關(guān)新聞推薦
1、高產(chǎn)磷酸吡哆醛功能性乳酸菌篩選、最適生長(zhǎng)溫度及生長(zhǎng)曲線圖繪制（一）
2、乳酸乳球菌的包埋體系LL@Fe-TA@mGN 生長(zhǎng)曲線測(cè)定及胃腸道抗性與體內(nèi)滯留能力（一）
3、BbRho5調(diào)控球孢白僵菌菌落生長(zhǎng)速率
4、泡菜中高效氨氮降解菌LJK8最大波長(zhǎng)及生長(zhǎng)曲線測(cè)定（一）
5、基于MIC和生長(zhǎng)曲線分析植物乳桿菌SCB2505代謝物對(duì)液化沙雷氏菌的抑菌機(jī)理（四）