細(xì)菌在生長繁殖過程中，可通過測定細(xì)菌的生長量，來了解細(xì)菌的各種生理生化狀態(tài)。目前，細(xì)菌生長量的測定主要有４類方法：細(xì)胞數(shù)目的測量（直接顯微計數(shù)法、平板活菌技術(shù)、載片培養(yǎng)技術(shù)、微孔過濾法、庫爾特計數(shù)器、流動細(xì)胞光度法、表熒光濾過技術(shù)、熒光抗體技術(shù)、微型ＥＬＩＳＡ、電子顯微鏡）；細(xì)胞量的測量（干重法、比濁法、離心壓縮細(xì)胞體積法）；細(xì)菌濃度的間接測量（通過測定核酸、蛋白質(zhì)、多糖、脂質(zhì)、ＡＴＰ等含量來估算菌濃度，或通過測量Ｃ、Ｎ、Ｏ和Ｐ等元素的含量間接計算菌濃度）；生物量在線檢測（微熱量計法、熒光法、電容／電導(dǎo)／阻抗法等）［１］。其中比濁法檢測成本低、快速，而在線檢測技術(shù)準(zhǔn)確，可實(shí)時分析細(xì)菌生長過程中的生長量，因此具有較好的應(yīng)用前景。該文以早期分離篩選的泰樂菌素降解菌——無丙二酸檸檬酸桿菌（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒａｍａｌｏｎａｔｉｃｕｓ）為材料［２］，比較了活菌稀釋計數(shù)法、比濁法和電導(dǎo)率法繪制該菌生長曲線的差異，為研究該菌的形態(tài)學(xué)特征、適應(yīng)性及泰樂菌素降解機(jī)理提供其生長量參數(shù)。
生長曲線的測定取４８ｈ培養(yǎng)后的泰樂菌素降解菌種子液，將種子液按１０％的接種量培養(yǎng)，分別在８～７２ｈ中，間隔８ｈ取樣。用活菌計數(shù)法測量培養(yǎng)基中細(xì)菌濃度，同時以１２１℃，滅菌２０ｍｉｎ的ＹＰＤ培養(yǎng)基為對照，采用比濁法測定菌液濃度，重復(fù)３次，計算平均值；分別在８～７２ｈ間，每間隔４ｈ取菌液１ｍＬ，加入裝有３０ｍＬ去離子水的試管中，同上條件超聲處理，取細(xì)胞破碎后的菌液５．０ｍＬ，用ＤＤ－１２Ａ型電導(dǎo)率儀測定電導(dǎo)率值，每個樣品測定３次，計算平均值。繪制泰樂菌素降解菌培養(yǎng)時間與Ｉｎ（ｃｆｕ／ｍＬ）以及ＯＤ５００ｎｍ和電導(dǎo)率值的生長曲線。
泰樂菌素降解菌的生長曲線
分別采用活菌稀釋計數(shù)法、電導(dǎo)率法和比濁法對泰樂菌素降解菌的生長曲線進(jìn)行測定，結(jié)果如圖１，圖２所示?；罹♂層嫈?shù)法測定的降解菌生長曲線符合細(xì)菌生長的各個階段：０～８ｈ為降解菌生長的延遲期，８～２４ｈ為對數(shù)生長期，２４～５６ｈ為穩(wěn)定期，５６～７２ｈ為衰亡期。電導(dǎo)率法測定的生長曲線也有明顯的延遲期、對數(shù)生長期和穩(wěn)定期，且延遲期和對數(shù)生長期的時間范圍和活菌稀釋計數(shù)法相似，但此法所測到的穩(wěn)定期為２４～７２ｈ，無衰亡期。而分光光度法的生長曲線始終保持上升狀態(tài)，無明顯的延遲期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期和衰亡期。
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