洋蔥伯克霍爾德菌群(Burkholderiacepaciacomplex，Bcc)是包括洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderiacepacia)在內(nèi)的一系列表型類似且16S rRNA高度同源的革蘭陰性菌的總稱[1-3]，臨床上是引起囊性纖維化(cystic fibrosis)患者、慢性肉芽腫(chronic granulomatous)患者及免疫力低下患者嚴(yán)重感染的條件致病菌。因其復(fù)雜且可變的基因組，Bcc可適應(yīng)低氧環(huán)境，實(shí)現(xiàn)呼吸道上皮黏附，且對(duì)臨床多種抗生素存在耐藥性。一旦感染，患者生命安全會(huì)受到巨大威脅。
本研究選取2個(gè)Bcc的典型種作為研究對(duì)象，其中洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderiacepacia)2株，新洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderiacenocepacia)1株，分別在氯化鈉、甘油、蔗糖調(diào)節(jié)的不同Aw條件下培養(yǎng)，通過(guò)全自動(dòng)生長(zhǎng)曲線分析儀繪制生長(zhǎng)曲線，探究不同調(diào)節(jié)劑作用下Bcc最低生長(zhǎng)Aw及Aw對(duì)其生長(zhǎng)曲線的影響。
不同水分活度(Aw)條件下Bcc生長(zhǎng)曲線
本研究表明，培養(yǎng)溫度為32.5 ℃時(shí)，Bcc在不同調(diào)節(jié)劑作用下最低生長(zhǎng)Aw為0.978(氯化鈉)、0.944～0.955(甘油)、0.971～0.978(蔗糖)，菌株之間有微小差異。本實(shí)驗(yàn)室在之前的研究中，通過(guò)定性實(shí)驗(yàn)表明菌株20170801-1在30～35 ℃最低生長(zhǎng)Aw為0.974～0.978(氯化鈉)、0.944(甘油)、0.962～0.965(蔗糖)[17]，與本研究結(jié)果基本一致，且與假單胞菌屬的最低生長(zhǎng)Aw接近。
對(duì)3種調(diào)節(jié)劑所得結(jié)果進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，氯化鈉和蔗糖作用下Bcc最低生長(zhǎng)Aw接近，與之相比甘油作用下則更低。這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致：在討論Aw作用時(shí)，氯化鈉與蔗糖對(duì)大多數(shù)細(xì)菌的影響是相似的，但甘油對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌抑制作用更強(qiáng)，而對(duì)于革蘭陽(yáng)性桿菌及革蘭陰性桿菌抑制作用更弱。
由于OD600生長(zhǎng)曲線與傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)所得生長(zhǎng)曲線有所區(qū)別，在細(xì)胞濃度較低時(shí)，OD600無(wú)法及時(shí)反映細(xì)胞數(shù)量變化。因此本研究無(wú)法直接探討Aw對(duì)Bcc生長(zhǎng)延滯期、生長(zhǎng)速率等經(jīng)典參數(shù)的影響，而是選擇TTD、曲線峰值、曲線斜率作為間接指標(biāo)。隨Aw降低，Bcc生長(zhǎng)曲線TTD延長(zhǎng)，曲線峰值及斜率整體呈下降趨勢(shì)。研究結(jié)果可以一定程度上估計(jì)Aw對(duì)Bcc生長(zhǎng)曲線在延滯期、生長(zhǎng)速率的影響，但仍有局限性，后續(xù)可通過(guò)建立Bcc生長(zhǎng)模型進(jìn)一步研究。明確Aw對(duì)Bcc生長(zhǎng)的影響，有助于非無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)在藥品處方設(shè)計(jì)、生產(chǎn)等階段正確評(píng)估Bcc污染的風(fēng)險(xiǎn)，為建立有效控制措施提供依據(jù)。
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