在醫(yī)學(xué)的微觀世界里,微生物樣本如同暗藏疾病密碼的鑰匙,精準(zhǔn)的樣本采集是解鎖健康奧秘的關(guān)鍵第一步。無(wú)論是血液、體液、組織還是分泌物,每一種樣本都承載著人體健康與疾病的重要信息,它們的采集方法直接影響著后續(xù)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,進(jìn)而關(guān)系到臨床診斷與治療方案的制定。


接下來(lái),我們將為你詳細(xì)介紹醫(yī)學(xué)中常見(jiàn)的各種微生物樣本采集方法,這篇指南將為你打開(kāi)一扇深入了解微生物樣本采集的大門,助你在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中更好地利用樣本這把“鑰匙”,為疾病的準(zhǔn)確診斷和有效治療提供有力支持。


人類口腔樣本采集(DNA樣本)


唾液


1)取樣前1h,不要進(jìn)食、飲水、飲酒、吸煙或嚼口香糖,建議晨起取樣。


2)受試者需要至少在口腔中分泌收集唾液1min。打開(kāi)無(wú)菌唾液采集器,采集未刺激流下的唾液。此過(guò)程需要重復(fù)多次采集到2-5mL唾液(不含泡沫部分)。馬上置入-80°C冰箱保存。


舌背菌斑


1)采樣前準(zhǔn)備:取樣前請(qǐng)受檢者清水漱口,去除口中可能含有的食物殘?jiān)?


2)采樣用無(wú)菌棉拭子(無(wú)菌生理鹽水潤(rùn)濕),以增加微生物附著率。將無(wú)菌拭子伸進(jìn)口腔,使拭子頭部充分接觸舌背,用適當(dāng)?shù)牧Χ壬舷虏羷?dòng),同時(shí)旋轉(zhuǎn)拭子,讓拭子頭部充分接觸舌背表面。采集2-3根拭子。


3)口腔拭子插入同一個(gè)無(wú)菌凍存管(或?qū)⒚奘米宇^部剪落入凍存管中),旋緊蓋子,馬上放入裝有碎冰或冰袋的保溫盒中,在最短時(shí)間(最長(zhǎng)不超過(guò)4h)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行DNA抽提或-80℃保存。


※注意:要求受試者在采樣前用無(wú)菌水漱口3次(每次10mL)以去除食物殘?jiān)?,使用無(wú)菌棉拭子從舌背中部擦拭3次(每根棉拭子/大約2cm長(zhǎng)的擦拭動(dòng)作)。


其他黏膜表面菌斑(如頰黏膜/上顎等)


1)采樣前準(zhǔn)備:取樣前請(qǐng)受檢者清水漱口,去除口中可能含有的食物殘?jiān)?


2)用無(wú)菌棉拭子(生理鹽水濕潤(rùn))擦取頰黏膜、上顎等部位表面的微生物,充分擦拭后將其放入無(wú)菌凍存管中,采集2-3根拭子,旋緊蓋子,馬上放入裝有碎冰或冰袋的保溫盒中,在短時(shí)間(最長(zhǎng)不超過(guò)4h)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行DNA抽提或-80℃保存。


※注意:


上顎采樣:需要無(wú)菌棉拭子擦取整個(gè)堅(jiān)硬的上顎約10s。


口腔粘膜采樣:無(wú)菌棉拭子擦取左側(cè)和右側(cè)的整個(gè)口腔粘膜區(qū),每側(cè)約10s,不要接觸到牙齒。


腭扁桃體采樣:無(wú)菌棉拭子分別擦取左側(cè)和右側(cè)的腭扁桃體5s。


牙菌斑


1)取樣部位:齦上牙菌斑(位于牙齦緣以上的牙面)、齦下牙菌斑(位于齦下,為牙齦所覆蓋),兩者處理方式相同,在獲得齦下牙菌斑時(shí)需注意清楚殘留的齦上牙菌斑。


2)取樣前需要記錄牙菌斑取自哪顆牙齒,如臼齒,前臼齒,門牙等(取樣時(shí)注意丟棄出血樣本)。


3)推薦使用環(huán)狀無(wú)菌取樣器或者無(wú)菌刮匙器,刮取盡量多的牙菌斑(無(wú)菌棉拭子反復(fù)擦拭),直接放入無(wú)菌凍存管中低溫保存和運(yùn)輸。如果牙菌斑含量較少,可以用PBS將取樣器上的牙菌斑洗下,將PBS一并放入無(wú)菌凍存管中(PBS的量不能超過(guò)6mL),置入-80℃冰箱保存。


※注意:角質(zhì)化的牙齦采樣:無(wú)菌棉拭子擦取顎前方的牙齦約10s。


齦溝液


1)齦下/黏膜下菌斑取樣時(shí),使用2mm×10mm濾紙條或02錐度35#吸潮紙尖,尖端切除0.5-1cm。濾紙條應(yīng)使用無(wú)菌工具處理,取樣前進(jìn)行高壓蒸汽滅菌并干燥。


2)持吸收紙尖或?yàn)V紙條,沿牙齒表面插入牙周袋,遇阻力堅(jiān)持30s后,放入0.6mL無(wú)菌離心管中,接著放入冰盒或干冰桶中運(yùn)輸。


※注意:應(yīng)將紙條或紙尖置于溝或袋的底部,以獲得疾病進(jìn)展前沿的菌斑。

咽喉


由于條件反射,這個(gè)部位非常難采集,若需要取,建議取完別的部位后再取,慢慢地將拭子放入咽部后方約5s。注意不要刮到扁桃體。


▲其他注意事項(xiàng):


①了解測(cè)試者的口腔病史,記錄相應(yīng)信息。


②一周內(nèi)使用過(guò)抗生素不建議采樣。


③建議在早上未進(jìn)食前或者餐后兩小時(shí)后取樣。


④采樣前禁止吸煙,禁止使用牙膏、漱口水、口香糖等清潔口腔產(chǎn)品。


⑤確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性,采樣時(shí)注意所使用耗材均為無(wú)菌產(chǎn)品。


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