稻瘟病是水稻最嚴(yán)重的病害之一，是由稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）侵染引起的水稻真菌性病害，該病害可以在所有水稻種植區(qū)和水稻不同生長(zhǎng)期暴發(fā)，具有分布廣、危害大的特點(diǎn)。在全球范圍內(nèi)，每年稻瘟病可使水稻減產(chǎn)10%～30%，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。然而，世界50%以上的人口以水稻為主食[2]，據(jù)國(guó)際糧食政策研究所分析，到2030年人類要在更少的種植面積上生產(chǎn)出目前水稻產(chǎn)量的1.38倍才能滿足人口日益增長(zhǎng)的需求[3]。因此，對(duì)稻瘟病菌防治的研究具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益。目前，利用生物防治控制水稻病害成為研究熱點(diǎn)。蜜環(huán)菌為食藥兼用真菌，其富含核苷類化合物、必需氨基酸、多肽、多糖和倍半萜類化合物等多種天然活性物質(zhì)，具有神經(jīng)調(diào)節(jié)、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、改善睡眠、調(diào)節(jié)血液循環(huán)、抑制腫瘤、延緩衰老等藥理作用。在醫(yī)學(xué)和食品上被廣泛應(yīng)用，但在農(nóng)業(yè)病害領(lǐng)域的作用研究較少，蜜環(huán)菌作為生物防治菌對(duì)稻瘟病菌的防控未見(jiàn)應(yīng)用。因此，蜜環(huán)菌對(duì)稻瘟病菌的作用研究具有重要意義和應(yīng)用價(jià)值。
生物防治具有藥害低、防效好、殘留少、不易產(chǎn)生抗藥性、環(huán)境兼容性好、選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，符合國(guó)家化學(xué)肥料和農(nóng)藥減施的長(zhǎng)遠(yuǎn)規(guī)劃。
蜜環(huán)菌屬是一類在全世界范圍內(nèi)廣泛分布的重要大型真菌。蜜環(huán)菌含有多種活性物質(zhì)，不僅在醫(yī)學(xué)上被用于增加機(jī)體免疫力、抑制腫瘤等，在控制真菌和細(xì)菌上也發(fā)揮重要作用。研究表明，蜜環(huán)菌的醇提取物在1 g/mL質(zhì)量濃度下，對(duì)黃金葡萄球菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌和枯草芽孢桿菌4種細(xì)菌有抑制作用；蜜環(huán)菌菌索提取液對(duì)常見(jiàn)微生物大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌也有抑制效果；蜜環(huán)菌菌粉醇提取物對(duì)蠟樣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃葡萄球菌、藤黃八疊球菌、根癌土壤桿菌、銅綠假單孢桿菌、大腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌8種細(xì)菌和白色念珠菌、葡萄假絲酵母2種真菌均有較好的抑制作用。
研究發(fā)現(xiàn)一種真菌M1對(duì)稻瘟病菌生長(zhǎng)具有抑制作用，經(jīng)分離、ITS鑒定該真菌為一種蜜環(huán)菌。但目前尚未見(jiàn)該屬真菌與稻瘟病菌之間的作用關(guān)系研究。
為了明確蜜環(huán)菌在稻瘟病菌防治中的實(shí)用價(jià)值，為后續(xù)生防制劑的研發(fā)提供理論依據(jù)，筆者測(cè)定了蜜環(huán)菌對(duì)稻瘟病菌的抑制率，分析了蜜環(huán)菌發(fā)酵液對(duì)稻瘟病菌的抑制作用，進(jìn)一步明確了該蜜環(huán)菌對(duì)稻瘟病菌生長(zhǎng)的抑制效果，為蜜環(huán)菌抑制真菌病害的研究和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。通過(guò)蜜環(huán)菌和稻瘟病菌的平板對(duì)峙培養(yǎng)以及蜜環(huán)菌發(fā)酵液對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的影響，探討蜜環(huán)菌對(duì)稻瘟病菌生長(zhǎng)的抑制作用。
實(shí)驗(yàn)方法
通過(guò)真菌M1的ITS測(cè)序，序列比對(duì)鑒定真菌種類。采用平板對(duì)峙培養(yǎng)和M1發(fā)酵液培養(yǎng)稻瘟病菌，分析真菌M1對(duì)稻瘟病菌菌株Y92-66b的拮抗作用，計(jì)算抑制率。
結(jié)果與結(jié)論
ITS序列比對(duì)確定該真菌M1為蜜環(huán)菌（Armillaria novae-zelandiae），對(duì)稻瘟病菌菌株Y92-66b具有顯著的抑制作用。密環(huán)菌與稻瘟病菌平板對(duì)峙培養(yǎng)其抑制率為48.80%；當(dāng)發(fā)酵液濃度達(dá)50%時(shí)，稻瘟病菌菌株Y92-66b的菌絲生長(zhǎng)抑制率為78.79%。
蜜環(huán)菌對(duì)稻瘟病菌菌株Y92-66b具有顯著的抑制效果，可作為稻瘟病生防菌的候選真菌。
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