噬菌體是特異性感染細(xì)菌等原核細(xì)胞生物的病毒,在發(fā)現(xiàn)之初即被用于治療細(xì)菌感染性疾病。雖然噬菌體治療在廣譜抗生素的沖擊下一度淡出歷史舞臺(tái),但對(duì)噬菌體及其宿主細(xì)菌的基礎(chǔ)研究捷報(bào)頻傳。本文聚焦于其中的代表——大腸埃希菌T2噬菌體。T2噬菌體是典型的烈性噬菌體,有人們熟知的噬菌體外形,從1930年代起被大量研究,產(chǎn)生了諸如一步生長(zhǎng)曲線、基因重組、DNA是遺傳物質(zhì)等多個(gè)里程碑級(jí)的科學(xué)發(fā)現(xiàn)。下面揭秘T2噬菌體的生長(zhǎng)曲線。


T2噬菌體


T2噬菌體是特異性感染大腸埃希菌(大腸桿菌)的病毒,具有典型的噬菌體外形。T2噬菌體外殼由蛋白質(zhì)構(gòu)成,頭部呈20面體,包裹有雙鏈DNA基因組;尾部呈棒狀,末端有尾鞘、尾絲等結(jié)構(gòu)。T2噬菌體是烈性噬菌體,侵染大腸埃希菌宿主時(shí),尾鞘收縮,頭部的DNA即通過(guò)中空的尾部注入細(xì)胞內(nèi)。一旦噬菌體DNA進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),會(huì)挾持細(xì)菌合成噬菌體所需的蛋白和DNA,在細(xì)菌中組裝子代噬菌體,最終細(xì)菌細(xì)胞破裂,繁殖的子代噬菌體釋放。

一步生長(zhǎng)曲線


1939年,Max Delbrück和Emory Ellis利用T2噬菌體感染模型發(fā)明了定量描述噬菌體感染細(xì)菌后生長(zhǎng)規(guī)律的一步生長(zhǎng)曲線(one-step growth curve)實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)通過(guò)用少量的病毒與大量的細(xì)菌細(xì)胞混合來(lái)確保每個(gè)噬菌體都吸附到細(xì)菌上而建立同步感染,同時(shí)用抗噬菌體血清中和未吸附的噬菌體,然后每隔一段時(shí)間取上清測(cè)定噬菌體的量。噬菌體吸附后的開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)(5~25min),噬菌體尚未完成復(fù)制、組裝和釋放,噬菌體數(shù)量不見(jiàn)增加,為潛伏期。緊接著(感染后25~50min),噬菌體數(shù)突然指數(shù)上升,表示噬菌體已從宿主細(xì)胞中裂解釋放出來(lái),稱(chēng)為裂解期。當(dāng)宿主全部裂解,噬菌體量不再增加,稱(chēng)為平穩(wěn)期。一步生長(zhǎng)曲線將噬菌體感染分為潛伏期、裂解期和平穩(wěn)期三個(gè)時(shí)期,并可以估算每個(gè)被感染的細(xì)胞釋放出來(lái)多少子代噬菌體,對(duì)了解和研究噬菌體的特性具有十分重要的意義,此后被推廣到幾乎所有病毒的研究。

圖一步生長(zhǎng)曲線


橫坐標(biāo)是時(shí)間(分鐘),縱坐標(biāo)是相對(duì)噬菌體量(實(shí)線),虛線是對(duì)應(yīng)溫度下未感染噬菌體的細(xì)菌生長(zhǎng)曲線


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