耐熱彎曲桿菌屬（thermotolerant Campylobacter spp.）是歐洲最主要的食源性致病菌，其中空腸彎曲桿菌（C.jejuni）、結(jié)腸彎曲桿菌（C.coli）和拉氏彎曲桿菌（C.lari）是主要致病種。其感染常導(dǎo)致急性胃腸炎，嚴(yán)重時可引發(fā)格林-巴利綜合征等并發(fā)癥。因此，食品中該類病原體的可靠檢測對公共衛(wèi)生至關(guān)重要。
國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 10272-1推薦使用博爾頓肉湯（Bolton broth）或普雷斯頓肉湯（Preston broth）進(jìn)行富集培養(yǎng)。普雷斯頓肉湯含有抗生素多粘菌素B和利福平，用于抑制雜菌生長。然而，這些抗生素也可能對目標(biāo)彎曲桿菌產(chǎn)生毒性。為此，標(biāo)準(zhǔn)建議添加“彎曲桿菌生長補充劑”（Filtrate of Bolton broth,FBP），以緩解抑制、促進(jìn)目標(biāo)菌復(fù)蘇。但長期以來，F(xiàn)BP的實際增效作用缺乏系統(tǒng)性定量評估。
德國聯(lián)邦風(fēng)險評估研究所（BfR）的Sarah Brueggemann-Schwarze團(tuán)隊近期在《International Journal of Food Microbiology》發(fā)表的研究，首次對FBP在普雷斯頓肉湯中的作用進(jìn)行了大規(guī)模、定量化的比較分析。研究覆蓋了來自食品和動物源的大量田間分離株，為富集策略的選擇提供了關(guān)鍵實證依據(jù)。
實驗設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)，采用qPCR方法對富集后彎曲桿菌的濃度進(jìn)行定量，并與傳統(tǒng)定性檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性驗證（圖1）。結(jié)果顯示，在純培養(yǎng)條件下，F(xiàn)BP的添加顯著提升了普雷斯頓肉湯的檢出性能。尤其對于拉氏彎曲桿菌（C.lari），陽性檢出率從不加FBP時的10%躍升至85%?？漳c彎曲桿菌（C.jejuni）則在所有測試條件下均能被完全檢出，表明其對該培養(yǎng)基耐受性較強。
研究進(jìn)一步將不同彎曲桿菌分離株接種于四種富集條件：博爾頓肉湯、普雷斯頓肉湯（±FBP），并在48小時后評估生長情況（圖2）。博爾頓肉湯表現(xiàn)出極強的富集能力，除7%的C.jejuni外，其余菌株均為陽性，最終濃度高達(dá)8.8–9.4 log??CFU/mL。這證實了其作為“通用型”富集液的可靠性。
相比之下，普雷斯頓肉湯在未加FBP時表現(xiàn)不佳，尤其對C.lari幾乎無效。而添加FBP后，其性能顯著改善，接近博爾頓肉湯水平。這一發(fā)現(xiàn)明確了FBP并非可有可無的輔助成分，而是普雷斯頓肉湯發(fā)揮有效功能的關(guān)鍵“激活劑”。
研究還模擬了真實食品基質(zhì)環(huán)境，測試了雞肉、菠菜、蛋殼和生牛乳等樣本中的富集效果（圖4）。有趣的是，在新鮮、高營養(yǎng)的基質(zhì)如雞肉、菠菜和蛋殼中，彎曲桿菌本身生長迅速，F(xiàn)BP的增效作用相對微弱。這說明在污染負(fù)荷高、菌體狀態(tài)良好的情況下，富集壓力較小，F(xiàn)BP的重要性降低。
然而，在生牛乳這類復(fù)雜且可能含應(yīng)激菌的基質(zhì)中，F(xiàn)BP的作用凸顯。經(jīng)FBP補充后，應(yīng)激狀態(tài)下的彎曲桿菌富集效率明顯提升。這揭示了FBP的核心價值：幫助處于亞致死損傷或營養(yǎng)脅迫狀態(tài)的彎曲桿菌恢復(fù)并增殖，從而避免假陰性結(jié)果。
基于此，研究提出了明確的實踐指導(dǎo)：普雷斯頓肉湯更適合用于高背景微生物污染的樣本（如攜帶超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸桿菌污染的食品）。在這些場景中，強效抗生素組合是必要的，而FBP則用于抵消其對目標(biāo)菌的附帶傷害。相反，博爾頓肉湯更適用于低背景或已知含有應(yīng)激菌的樣本，因其本身營養(yǎng)豐富且抑制性較溫和。
該研究的另一大亮點在于其評估方法的創(chuàng)新。作者提出，未來對富集培養(yǎng)基性能的監(jiān)測，不應(yīng)僅依賴實驗室標(biāo)準(zhǔn)菌株，而應(yīng)采用自然應(yīng)激狀態(tài)的田間分離株結(jié)合真實食品基質(zhì)進(jìn)行測試。這種方法更能反映實際檢測中的挑戰(zhàn)，確保方法的穩(wěn)健性和可靠性。
總之，這項工作不僅澄清了FBP在普雷斯頓肉湯中的關(guān)鍵作用，還為實驗室在不同檢測場景下選擇最優(yōu)富集策略提供了科學(xué)依據(jù)。在食品安全日益受到重視的今天，這種基于實證的精細(xì)化方法優(yōu)化，正是提升病原體檢出率、保障公眾健康的重要一環(huán)。
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