2、結果與分析
2.1金黃短桿菌CT-A16的生物學特性
2.1.1金黃短桿菌CT-A16的培養(yǎng)特征和形態(tài)特征
取供試金黃短桿菌CT-A16接種于NA平板培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)3 d，觀察到菌落顏色為白色，菌落邊緣光滑平整，通過顯微鏡觀察菌體呈短桿狀。對菌體進行革蘭氏染色、芽孢染色、莢膜染色，結果顯示金黃短桿菌CT-A16為革蘭氏染色為陽性，無芽孢，有莢膜。
2.1.2金黃短桿菌CT-A16最適溫度的測定
由圖1可知，金黃短桿菌CT-A16的OD值隨著培養(yǎng)溫度的逐步升高而升高，在培養(yǎng)溫度為30℃時OD值最大。在30~40℃時，隨著培養(yǎng)溫度的增加，OD值呈下降趨勢，因此金黃短桿菌CT-A16的最適生長溫度為30℃。
2.2金黃短桿菌CT-A16最適pH值
由金黃短桿菌CT-A16最適pH值的測定結果（圖2）表明：隨著pH值的升高，金黃短桿菌CTA16菌液的OD值逐步升高，待pH值為6時達到最高值，隨后OD值隨pH值的增加呈下降趨勢。即最佳生長pH值為6.0，適宜金黃短桿菌CT-A16生長的pH值范圍為5.0~7.0。
圖2不同pH值對金黃短桿菌CT-A16的影響
2.3金黃短桿菌CT-A16的生長曲線
金黃短桿菌CT-A16生長曲線（圖3）的測定結果表明，由金黃短桿菌CT-A16不同時段內的OD值所反映出的生長曲線呈現(xiàn)出階段性變化。第一階段為遲滯期：生長16 h內，OD值呈現(xiàn)逐步增長的趨勢，增長速度非常緩慢；第二階段為對數(shù)生長期：生長16~36 h內，OD值呈現(xiàn)快速增長趨勢，36 h時OD值達到峰值；隨后進入穩(wěn)定期：生長36~40 h（或40 h以后）內OD值不再增加并出現(xiàn)降低現(xiàn)象。綜上所述，在測定時間內,內生金黃短桿菌CT-A16的生長階段為：遲滯期細菌接種至培養(yǎng)基后，對新環(huán)境有一個短暫適應過程；對數(shù)生長期細菌快速繁殖增長，菌數(shù)顯著增多，此時期活菌數(shù)直線上升，細菌以穩(wěn)定的幾何級數(shù)極快增長;第三階段穩(wěn)定期培養(yǎng)40 h時內生細菌基本上是處于穩(wěn)定期的階段，尚未進入衰退階段。
圖3金黃短桿菌CT-A16的生長曲線
2.4金黃短桿菌CT-A16發(fā)酵過濾液對病原菌菌絲生長的抑制效果
通過對病原菌菌絲生長情況進行觀察，統(tǒng)計不同比例內生金黃短桿菌過濾液對不同病原菌的抑制率（表1），由表1可以看出，內生金黃短桿菌CTA16對病原菌的抑制效果較好，在菌液濃度為20%時，內生金黃短桿菌CT-A16對油疤病菌原菌的抑制效果最好。
表1不同濃度金黃短桿菌CT-A16過濾液對病原菌菌絲生長的抑制率
2.5金黃短桿菌CT-A16發(fā)酵滅菌液對病原菌菌絲生長的抑制效果
通過對病原菌菌絲生長情況進行觀察，統(tǒng)計不同種不同比例內生金黃短桿菌滅菌液對病原菌的抑制率，結果如表2所示，濃度為20%的金黃短桿菌CT-A16滅菌液對油疤病菌的抑制效果最佳，其次是疣孢病菌、蛛網(wǎng)病菌。
2.6金黃短桿菌CT-A16發(fā)酵過濾液對病原菌孢子萌發(fā)的抑制效果
通過對病原菌孢子萌發(fā)生長情況進行觀察，統(tǒng)計不同比例內生菌過濾液對不同病原菌的抑制率，結果見表3。內生金黃短桿菌CT-A16對于病原菌抑制效果最好的濃度為40%，對疣孢病菌、油疤病菌都能100%地抑制孢子的萌發(fā)，對蛛網(wǎng)病菌孢子萌發(fā)的抑制效果相對較弱。
表3不同濃度金黃短桿菌CT-A16過濾液對病原菌孢子萌發(fā)的抑制率
2.7金黃短桿菌CT-A16發(fā)酵滅菌液對病原菌孢子萌發(fā)的抑制效果
通過對病原菌孢子萌發(fā)生長情況進行觀察，統(tǒng)計不同比例內生菌滅菌液對不同病原菌孢子萌發(fā)的抑制效果，結果見表4。濃度為40%的內生金黃短桿菌CT-A16發(fā)酵滅菌液對病原菌的抑制效果最佳，對疣孢病菌和油疤病菌的抑制效果較好。
表4不同濃度金黃短桿菌CT-A16滅菌液對病原菌孢子萌發(fā)的抑制率
2.8金黃短桿菌CT-A16揮發(fā)性物質對病原菌菌絲生長的抑制效果
通過觀察病原菌與內生金黃短桿菌CT-A16對接密封的培養(yǎng)皿中病原菌的菌絲生長狀況，結果表明：內生金黃短桿菌CT-A16揮發(fā)性物質對病原菌菌絲生長具有一定的抑制作用。從表5可以看出，內生金黃短桿菌CT-A16揮發(fā)性物質對于油疤病菌、蛛網(wǎng)病菌的抑制效果比較好，對于疣孢病菌的抑制效果相對較弱。
表5金黃短桿菌CT-A16揮發(fā)性物質對病原菌菌絲生長的影響
3結論與討論
金黃短桿菌CT-A16的生物學特性測定結果表明，金黃短桿菌CT-A16菌落顏色為白色，菌落邊緣光滑平整，通過顯微鏡觀察菌體呈短桿狀。對菌體進行革蘭氏染色、芽孢染色、莢膜染色，結果顯示：金黃短桿菌CT-A16為革蘭氏染色為陽性，無芽孢，有莢膜。金黃短桿菌CT-A16進行最適溫度為30℃，最適pH值為6.0。
由金黃短桿菌CT-A16對3種食用菌病原菌的生防效果可以看出，不同濃度金黃短桿菌CT-A16過濾液和滅菌液對病原菌菌絲生長均具有一定的抑制效果。其中濃度為20%的金黃短桿菌CTA16過濾液對病原菌的抑制效果較好，對疣孢病菌的抑制率達到66.53%，對油疤病菌的抑制率為62.73%，對蛛網(wǎng)病菌的抑制率為83.58%。在不同濃度金黃短桿菌CT-A16過濾液和滅菌液對病原菌孢子萌發(fā)的測定中發(fā)現(xiàn)，濃度為40%金黃短桿菌CT-A16對于3個病原菌的抑制效果都非常明顯；金黃短桿菌CT-A16的揮發(fā)性物質對病原菌菌絲生長也表現(xiàn)出一定的抑制作用。
內生菌對植物病害的生物防治已研究多年并取得了很好的應用效果，何紅等也證實了分離自辣椒的內生芽孢桿菌對辣椒炭疽病菌有拮抗活性。用植物內生的枯草芽孢桿菌處理辣椒苗，然后再接種病原菌，能夠將發(fā)病率降低81.49%~93.34%。內生菌的拮抗效果除了在實驗室的抑菌效果測定外，還需要在大生產過程中的實際應用，以進一步驗證內生菌的拮抗效果，這將是今后內生細菌的研究熱點。